UDG酶
储存方法:-80℃长期保存
如需频繁使用,可存放于-20℃。
产品简介:
本制品来源于大肠杆菌重组克隆表达,可催化含尿嘧啶(U)的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶,对RNA无活性,最适反应温度为50℃,分子量为25 kDa。主要应用于PCR扩增产物的防污染,它的作用原理基于,在PCR反应中以dUTP替代dTTP掺入DNA中形成含dU碱基的PCR扩增产物,此扩增产物DNA中U基的糖苷键被UDG作用而断裂后,使DNA链在失去U基处极不稳定,导致在随后的加热步骤中被降解并使UDG灭活。因此在PCR反应体系中用dNTP代替dUTP,加入UDG酶,并在进行PCR反应之前进行50℃ 2min处理以消化前一次实验PCR反应的扩增产物,起到预防污染的作用。
产品组成:
酶活定义:
在20mM Tris-HCl(pH 8.0),1mM EDTA,10mM NaCl条件下,于37℃ 1小时降解1μg含dU碱基的单链DNA的酶量为1U。
注意事项:
UDG酶能很好的工作于常用的各种PCR反应体系,因此在PCR反应液中加入UDG酶即可,无需另加UDG缓冲液,但因各反应体系不同,UDG酶的加入量需依据反应体系进行调整。
UDG酶可以在PCR反应前先清除不慎污染的U-DNA分子,一个实验室必须在所的反应中使用dUTP作为dTTPs之一,使所有扩增产物均为U-DNA。如单用于某个检测,T-DNA仍会累计,这个抗污染系统也难以发挥到完全作用。
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